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人肝癌H 4 M细胞系的建立及其遗传特征分析

目的:通过原代细胞培养法体外建立H4M人肝癌细胞系,并分析其遗传特征。
方法将分离的肿瘤细胞转化为单个细胞的悬浮液。将细胞系在含有20%胎牛血清的DMEM培养基中培养。通过G染色体的条带进行细胞遗传学分析,通过对比基因的杂交分析肿瘤细胞的基因组,修饰基因,并通过DNA方法使用细胞系细胞周期蛋白D1分析扩增。-PCR
[结果]G染色体带显示H4M细胞为高倍体,其中一条染色体含有较长的均匀染色区(hsr)。
基因组杂交(CGH)的比较分析显示H4M的细胞遗传学变化增加了2.5.6p,7p,11p,13q21.3-qter,而11q13是高拷贝数扩增,8pter-p12表明了。9,13q11-Q21.2,16q,17pter-p12,19p,Xpter-q13丢失了。
H4M细胞系的CCND1基因被明显扩增。
结论原代培养的H4M肝癌细胞系与原发癌保持相同的生物学特性。它在体外经过60代,细胞形态不变,生长周期恒定,预计是稳定的细胞系。